1. 為了盡可能延長ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色譜柱的使用壽命,請密切關注以下方面
●水的品質(包括水純化系統)
●溶劑品質
●流動相的制備、儲存和使用期限
●樣品、緩沖鹽和流動相的溶解性
●樣品質量及其前處理
2. 出現問題時,往往只需要糾正一個不當的操作。
3. 請務必記住:
●使用在線過濾器裝置,或者優選VanGuard保護柱
●盡可能避免使用100%水相流動相,以阻止細菌滋生
●每24~48小時更換一次水相流動相(如果必須使用100%水相流動相)
●每24~48小時需將舊的100%水相流動相丟棄以阻止細菌滋生
●每次向流動相A添加5%~10%有機溶劑,以調節梯度曲線
●用0.2μm濾膜過濾流動相的水相部分
●維護水純化系統,使其保持良好的工作狀態。
●盡可能只使用超純水(18 MΩ•cm)和優質溶劑。使用HPLC級水,而不是UPLC級水。
●考慮樣品前處理(如固相萃取、過濾等)。
4. 避免事項(在可能的情況下):
●100%水相流動相(如果可能)
●HPLC級瓶裝水
●“直接加裝"流動相
●使用舊置的水相流動相。切記每24~48小時徹底沖洗流動相儲液瓶,并制備新鮮流動相
●磷酸鹽緩沖液與高濃度乙腈(如 > 70%)一起使用,可能會出現沉淀
5. 請勿在觀察到背壓過高或峰分裂時便認定是由于色譜柱失效所引起:
●調查色譜柱出現故障的原因
●柱壓
●流動相是否長菌、沉淀析出和/或樣品的問題
●峰分叉
●樣品質量
●進樣溶劑的強度
6. 請牢記:通常UPLC流速較低,因此流動相消耗會慢很多(請僅制備所需的流動相或將多余的流動相冷藏保存)。
7. 流動相相關問題:
●是否在使用100%水相流動相?能否在流動相A中加入少量有機溶劑?
●是否要使用0.2 -m濾膜過濾水相流動相?
●流動相配了多久?是否需要在儲液瓶上注明制備日期?
●每24~48小時需添加流動相還是制備新鮮流動相?
●水的質量如何?水的質量最近有變化嗎?水純化系統是如何工作的?上一次維護是什么時候?
●是否在使用pH 7的磷酸鹽緩沖液(在此條件下非常容易滋生細菌)?
8. 樣品相關問題:
如果以流動相配制的純標準品進樣,是否會出現這些問題?
●如果按照樣品前處理方法(如SPE、過濾等)用水
●制備標準品,是否仍會出現這些問題?
●樣品是否隨時間發生了變化?