固相萃取柱是一種基于化學吸附原理的樣品預處理技術,可以用于生物醫學領域中的樣品制備和分離純化。使用過程:
活化:也稱溶劑化,加入合適的溶劑使吸附劑上的官能團展開,并除去吸附劑上可能存在的干擾物,對于反相吸附劑常常用中等極性溶劑(比如甲醇),正相吸附劑常常用弱極性或非極性溶劑(比如己烷);
平衡:除去活化溶劑為上樣創造適宜的溶劑環境,所用溶劑通常與樣品溶液的溶劑一致;對于離子交換柱,如果樣品是堿性化合物平衡液中往往需要加入酸,如果樣品為酸性化合物平衡液中往往需要加入堿;
保留:當樣品溶液通過吸附劑,吸附劑與某些化合物的作用力超過后者與溶劑的作用力時,這些化合物就會被吸附劑固定,該過程稱為保留;
淋洗:上樣后,部分干擾物與目標化合物同時被保留,需要加入合適的溶液以最大可能地除去干擾物而不影響目標化合物的保留,通常情況下用上樣時的樣品溶劑淋洗不會影響回收率,但洗脫強度較人的溶劑能較大程度地去除干擾物,選擇淋洗液時需要在回收率和凈化效果間找到平衡點;
洗脫:讓洗脫能力較強的溶劑通過吸附劑,打斷吸附劑與被保留的化合物之間的作用力,使這些化合物隨溶劑從吸附劑中流出;通常情況下,能剛好洗脫目標化合物的洗脫溶劑是很好的選擇,此時洗掉的干擾物最少,選擇洗脫液時也需要在回收率和凈化效果間找到平衡點。